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【求助/交流】质粒浓度只有65ng/ul 能用来测序吗

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解决时间 2021-11-13 11:19
【求助/交流】质粒浓度只有65ng/ul 能用来测序吗
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估计有点悬……可以试一试,一定得多送几个平行样susizheng(站内联系TA)浓度已经可以了。额,我们自配溶液提质粒基本不用测浓度,都是直接送测序,或者你怕不行直接送菌液也行啊。 我是做完菌液PCR,正确以后提了质粒,酶切也正确,条带也清晰,但不知怎么回事测的浓度很低,担心影响测序。你们不测浓度 怎么保证你们的质粒没问题呢郝钊(站内联系TA)我一直以为测序首先要PCR扩增,然后测序,难道是拿到质粒直接就可以测?zgb1982(站内联系TA)哦!忘记说了,我们是先菌落(如果太小就再画线)PCR,挑有条带的摇菌液,提质粒30ul,2ul酶切验证。剩下给公司测序,自己也可以留点,不过还有菌落在。yhmew(站内联系TA)测序的话50ng/vl就够了,一般上反应要150ng,体系是可以调整的。送菌液也是可以的,会先帮你提质粒,然后测序.:)yucheng9255(站内联系TA)Originally posted by yhmew at 2011-04-01 10:50:27:上反应跟测序有区别吗? 我是送到TAKARA 不收菌液 测序就是用引物和模版反应啊,和PCR差不多的,可因根据你的样品调整你的反应,一个反应150ng就够了,只是浓度低的话,体系要扩大,影响反应结果。不过只要>50ng/vl一般都是没有问题的。
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