elisa的基本原理

elisa的基本原理

ELISA的原理：
ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性，酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性，又保留酶的活性。
进行检测时，样品中的受检物质（抗原或抗体）与固定的抗体或抗原结合。通过洗板除去非结合物，再加入酶标记的抗原或抗体，此时，能固定下来的酶量与样品中被检物质的量相关。通过加入与酶反应的底物后显色，根据颜色的深浅可以判断样品中物质的含量，进行定性或定量的分析。
由于酶的催化效率很高，间接地放大了免疫反应的结果，使测定方法达到很高的灵敏度。
1971年Engvall和Perlmann发表了酶联免疫吸附测定（enzymelinkedimmunosorbentassay, ELISA）用于IgG定量测定的文章，使得1966年用于抗原定位的酶标抗体技术发展成液体标本中微量物质的测定方法。
ELISA可用于测定抗原，也可用于测定抗体。这种测定方法中有3种必要的试剂：
1.  固相的抗原或抗体；
2.  酶标记的抗原或抗体；

3.  酶作用的底物。

根据试剂的来源和标本的性状及检测的具备条件，可设计出各种不同类型的检测方法。

抗原和抗体的结合

ELISA即酶联免疫吸附实验，原理：包被抗体或抗原，然后加入待检物，里面的抗原或抗体与包被板上产生特异性结合，再通过酶来催化显色反应，显色反应后的吸光度OD值与酶的量相关，而酶的量与待检物相关，故可以检测待检物含量。具体方法有直接法，间接法，竞争法，捕获法，阻断法等。

ELISA基本原理是抗原或抗体预先结合到某种固相载体表面;测定时，将待测样品(含待测抗体或抗原)和酶标抗原或抗体按一定程序与结合在固相载体上的抗原或抗体反应形成抗原抗体复合物;反应终止时，固相载体上酶标抗原或抗体被结合量(免疫复合物)与待测标本中待检抗体或抗原的量呈一定比例;经洗涤去除反应液中其他物质，加入底物进行显色，最后通过定性或定量分析有色产物量即可确定样品中待测物质含量。