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做ELISA对梯度怎么要求的

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解决时间 2021-02-15 15:36
做ELISA对梯度怎么要求的
最佳答案
  • 做ELISA的时候老板让我们选择的抗原or抗体都是有明显梯度的,不是很明白他们的观点,有时候稀释不同的倍数但是活性相差不大,就象在一个平台区段自己感觉在这么一个范围里面都可以使用应该更好,这样即使是有很小的取样误差也不会影响实验,应该更好才对!做ELISA对梯度这么要求究竟是什么目的,具体怎么要求的啊
  • (1)我们做ELISA试验时是要求梯度比较明显的才是好的抗原,每个抗原都会有一个最适平台期,就是在这个范围之内变化浮动不会很明显,所以我们会选择平台期的起点不会选择终点。如果你没有做到他的下限的话就不会知道抗原在哪个浓度时是平台期的终点,有可能你选择的是终点,这样就不是最佳的抗原浓度。等到做稳定性试验时灵敏度应该会下降的很明显。
  • 既然选择的是平台期的起点,那么也就是再往后是一个平台期了,那也不会有什么梯度了,这样看得话有明显梯度的,如果处于下降阶段的反倒没什么用了,这样更难找平台期的起点
  • (2)看你走的包被浓度的范围怎么样,如果跨度很大的话,梯度就会很明显。反之跨度小的话就不会有很明显的梯度,说明你应该在这一段之间选择最适浓度.
  • 全部回答
    不需要稀释吧,直接以样品的正常血清作为对照即可!
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