怎么判断提取的RNA有没有基因组DNA污染
答案:1 悬赏:0 手机版
解决时间 2021-03-31 06:36
- 提问者网友:戎马万世
- 2021-03-31 03:38
怎么判断提取的RNA有没有基因组DNA污染
最佳答案
- 五星知识达人网友:拜訪者
- 2021-03-31 04:02
260/280的比值可以判断比较严重的基因组污染。
也可以通过跑琼脂糖胶看加样孔里亮不亮作为一个参考依据。
其实一般很难保证RNA没有基因组污染的,特别是加入氯仿后的剧烈震荡会促进dna溶解到水相里,后面就很难分离了。
有些许的基因组污染的样品也能够满足大部分的实验要求。
所以在rt-pcr等试验中才要求设计的引物要跨intron,这样就可以区分扩增产物的模板来自于mRNA还是基因组dna
也可以通过跑琼脂糖胶看加样孔里亮不亮作为一个参考依据。
其实一般很难保证RNA没有基因组污染的,特别是加入氯仿后的剧烈震荡会促进dna溶解到水相里,后面就很难分离了。
有些许的基因组污染的样品也能够满足大部分的实验要求。
所以在rt-pcr等试验中才要求设计的引物要跨intron,这样就可以区分扩增产物的模板来自于mRNA还是基因组dna
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