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qPCR标准曲线

答案:1  悬赏:0  手机版
解决时间 2021-02-26 02:09
最近一直在做转基因水稻的外源拷贝数检测,其中要制备标准品作标准曲线,按照测定浓度计算拷贝数后按10^6-10^110倍梯度稀释,前面到10^2曲线线性关系都很好,为什么每次10^1都很不稳定,希望哪位专业人士给些指导意见,我觉得稀释方法和配置都没问题,主要跟哪些因素有关呢?很郁闷的说!
最佳答案
无论什么方法都有个检测下限,也就是说,当浓度低于这个值的时候,此种方法就检测不到了,即使有数值也是不可信的。10^1的单位是“个”copy吗?据我个人的经验,没有什么方法的检测精度有这么高的...(能检测出10个分子,方法本身就可以发science了吧...)或者,你可以查一下你这个方法的检测下限是多少~如果你样品的copy数比较高,前面的点的线性又非常好,大可不必纠结于这一个数值,以前几个做标准曲线就行了~
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