western blot样品存放负80，用时还需煮沸吗
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解决时间 2021-02-28 20:59
- 提问者网友：沉默的哀伤
- 2021-02-28 17:11
western blot样品存放负80，用时还需煮沸吗
最佳答案
- 五星知识达人网友：酒醒三更
- 2021-02-28 17:52
做组织样品的western blot的时候 组织样品必须进行研磨、匀浆、超声处理。 蛋白质溶解度会更好，离心要充分，膜蛋白需用更剧烈的方法抽提，低丰度膜蛋白可能还要分步抽提(超速离心)。还有一点就是组织中的蛋白酶活性更强，需要注意抑制蛋白酶的活性(加入PMSF和蛋白酶抑制剂cocktail)，封闭剂一般5%脱脂奶粉较常用。如果一抗为多克隆抗体，使用BSA也是不错的选择。
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- 1楼网友：零点过十分
- 2021-02-28 19:26
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