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在做克隆时,载体与目的片段的比例怎样确定?比例不对,是造成假阳性的主要问题吗?

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解决时间 2021-10-22 01:36
在做克隆时,载体与目的片段的比例怎样确定?比例不对,是造成假阳性的主要问题吗?
最佳答案
载体与插入片段比例一般是1:10,通过测定DNA浓度来调整。单酶切片段插入时,载体一定要去磷酸化,载体易自连;双酶切二者比例要适当,比例不对,载体也会自连,因为微生物有自己的修护系统。
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