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今天做植物总DNA的提取,检测时A260/A280≈2.2。这个值比1.8大很多,想知道是什么原因造成的。大家帮忙下

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解决时间 2021-12-02 21:20
今天做植物总DNA的提取,检测时A260/A280≈2.2。这个值比1.8大很多,想知道是什么原因造成的。大家帮忙下
最佳答案
有想过是你做吸光度测定时参照物没有选好,或者是你选择的提取方法有些问题,找出杂质,可以做几个比对看看追问该实验是用CTAB法提取植物总DNA。但最后要测吸光度时是用冰水溶解的,空白对照自然也就用冰水调零,这个有影响吗(实验材料是用TE缓冲液或重蒸馏水溶解)。还有就是如果没有彻底晾干的话,残留的有机溶剂是否会有影响。因为今天用70%酒精洗涤时晾了很久也没干,还残留了点,就马上溶解了。追答如果你怕的话就用TE缓冲液做次对比,看看有无影响否,但是你的实验过程选用的CTAB法具体还有很多不一样的地方,包括你选取的萃取剂,以及你具体的实验操作啊追问恩,谢谢啊。
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原理:A260是磷酸吸收最高,A280是蛋白中芳香环的吸收最高,可能是有磷酸污染,比如RNA
可能RNA污染追问那怎样判定是RNA污染,那能不能说RNA除杂不彻底呢。追答不行啦,太长时间,记不清啦,还可能是蛋白质
只知道干扰,等待高人把追问不过还是谢谢你。但如果是蛋白质干扰的的话,它的比值应该会偏小
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