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CsCl梯度离心形成条带的原理

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解决时间 2021-04-10 01:15
在质粒纯化时使用的CsCl梯度超速离心,当配置的溶液CsCl浓度一样,但是使用的超速离心管是7.5ml和15ml时(15的比7.5的长一倍),它们形成的条带是怎么样的?个人猜测结果一:条带一样,但15的宽度变成7.5的两倍;二:在15的底部和上部形成7.5所没有的其它密度的带;三:或其它情况
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条带是一样的,跟管子大小没有关系。当加入的量是一定的时候,质粒DNA就那么多,不管怎么离都是那么多东西。溶液离完后由于管子的长短以及横截面积不一样而液面高度不一样。所以DNA的条带位置也会不一样,但是DNA条带所处的CsCl的密度都是一样的。

氯化铯在生物研究中的作用:密度一梯度离心是一种离心新技术,可以将质量差异微小的分子分开。用氯化铯浓盐液,以105g以上的强大离心力的作用,盐的分子被甩到离心管的底部。同时,扩散作用使溶液中Cs+和Cl-离子呈分散状态,与离心力的方向相反,经过长时间的离心,溶液达到一种平衡状态。反向扩散力与沉降力之间的平衡作用,产生了一个连续的CsCl浓度梯度。离心管底部溶液的密度最大,上部最小。DNA分子溶于CsCl溶液中,经过离心,将逐渐集中在一条狭窄的带上。带上的DNA分子密度与该处CsCl相等。
全部回答
在密度梯度介质中进行的依密度而分离的离心法。各组分会依其密度分布在与其自身密度相同的液层中。密度梯度可以离心前预先制备(如叠加不同浓度蔗糖、甘油)或在离心中自然形成(如使用氯化铯时)。离转轴较远的一段密度会比较大,为离心管的下端,密度高的物质会停留在那。
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