菌落pcr和菌液pcr在原理和操作方面有什么区别
答案:1 悬赏:0 手机版
解决时间 2021-02-15 13:48
- 提问者网友:不要迷恋哥
- 2021-02-14 21:24
菌落pcr和菌液pcr在原理和操作方面有什么区别
最佳答案
- 五星知识达人网友:思契十里
- 2021-02-14 22:08
菌落pcr和菌液pcr在原理和操作方面有什么区别
如果转化成功的话,菌落里的菌就含有你克隆的质粒载体了,用枪头直接碰一下,然后作为PCR模板,就可以进行PCR扩增了。但是菌落PCR鉴定的假阳性率其实也不低,所以建议你挑取菌落扩培之后抽提质粒,进行酶切鉴定,这样比较准确,酶切鉴定确认好之后再去测序以确定没有碱基突变或缺失。
你说的T7通用引物是指载体上的T7 promtor引物吗?那只是一条引物啊,如果加上GBH下游引物的话,扩增出来的就是你连接进去的目的基因的长度了。
如果转化成功的话,菌落里的菌就含有你克隆的质粒载体了,用枪头直接碰一下,然后作为PCR模板,就可以进行PCR扩增了。但是菌落PCR鉴定的假阳性率其实也不低,所以建议你挑取菌落扩培之后抽提质粒,进行酶切鉴定,这样比较准确,酶切鉴定确认好之后再去测序以确定没有碱基突变或缺失。
你说的T7通用引物是指载体上的T7 promtor引物吗?那只是一条引物啊,如果加上GBH下游引物的话,扩增出来的就是你连接进去的目的基因的长度了。
我要举报
如以上问答信息为低俗、色情、不良、暴力、侵权、涉及违法等信息,可以点下面链接进行举报!
大家都在看
推荐资讯