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经过pcr扩增之后,为什么就能证明基因的表达量的多少

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解决时间 2021-03-18 18:51
经过pcr扩增之后,为什么就能证明基因的表达量的多少
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基因表达水平一般是通过该基因转录的mRNA的多少来衡量的,PCR之后可以通过产量的多寡来判断。但是普通PCR一般只能定性判断基因表达量,实时荧光定量PCR可以通过PCR扩增来定量计算RNA含量(通过比较内参的ct值)。所以,传统曲线只能定性判断,实时荧光定量PCR曲线可以定性判断。
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你用的是半定量pcr的方法,现在已经不再被主流杂志接受了,当然不论用什么方式,一定是用的cdna为模板的。而且做pcr之前一定要先跑电泳确定pcr反应体系中模板量保持一致,而且要再用一组内参基因(actin,gapdh之类都ok)引物同时进行pcr,计算时用靶基因的量减去内参基因的量,然后再比较。
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