如何利用慢病毒载体构建稳定表达外源基因的细胞系不

答案:2 悬赏:10 手机版

解决时间 2021-03-07 15:39

提问者网友：沉默的哀伤
2021-03-06 20:55

最佳答案

五星知识达人网友：孤独的牧羊人
2021-03-06 22:12

真核表达载体包括腺病毒载体和慢病毒载体，在真核细胞内用于表达目的蛋白的载体都可以叫做真核载体。腺病毒载体携带外源基因较大，可瞬时高表达。慢病毒载体携带外源基因较小些，但可以重组入细胞基因组，稳定高表达。
1.将外源基因插入慢病毒载体
2.将构建完成的载体与慢病毒包装质粒混合，共转染靶细胞
3.收集病毒液
4.用病毒液感染靶细胞
5.用载体上带的抗生素进行筛选，如果没有，可以用无限稀释法
6.获得稳转株

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1楼网友：洒脱疯子
2021-03-06 23:24

1.将外源基因插入慢病毒载体 2.将构建完成的载体与慢病毒包装质粒混合，共转染靶细胞 3.收集病毒液 4.用病毒液感染靶细胞 5.用载体上带的抗生素进行筛选，如果没有，可以用无限稀释法 6.获得稳转株具体可以参考该文献：《c-met基因sirna慢病毒表达载体的构建及其稳定转染细胞》

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