PET28a连接目的基因问题

PET28a连接目的基因问题

建议你做一个双酶切看看，你的目的条带是不是成功连接上了。
你的pET28a的酶切位点是哪个，是不是连接出现了问题。
即使连接成功了，还有可能是你的基因需要加入诱导剂才会正常生长。该质粒上有lac调控区，你的菌需要诱导不，确认一下。追问酶切位点是NdeI和XhoI。连接成功后，我将连接产物转化到BL21菌株中还需要加入诱导剂吗?直接正常转化不就应该可以长吗追答应该是需要诱导该基因才会表达的，你可以试一下

除了检查是否酶切不彻底、连接不上的问题外，个人觉得优先确认感受态是否正常是必需步骤啊。