引物设计时引物是不是得在atg前面

引物设计时引物是不是得在atg前面

看你的目的了，如果你是要做表达克隆的话，只有强行从atg开始设计了，看运气吧，如果primer和oligo分数太低难以进行pcr可以考虑降低碱基的数目，或者按照密码子表更改碱基，但注意不要改变氨基酸。
又或者你可以在atg之前插入一些碱基修饰一下你的引物，不过如果你做表达克隆，尤其是融合表达时不能改变你的编码框。
如果做的是TA克隆。那就按照模板上死命扩吧。。不过估计你最后还是要表达吧？

没有关系的，不影响，只要pcr能p出atg不影响基因表达就ok,多几个上游碱基没事。关键不在这里在于设计的引物要符合引物设计的基本原则，越符合越好。