一般步骤的最后一步:免疫沉淀反应后,在4°c 以3,000 rpm 速度离心3 min,将琼脂糖珠离心至管底;将上清小心吸去,琼脂糖珠用1ml裂解缓冲液洗3-4次;最后加入15μl的2×sds 上样缓冲液,沸水煮5-10分钟;
一般的步骤到这里之后就直接说上SDS-PAGE了,我想问的是煮沸之后,管内剩下的成分是哪些?是取上清跑电泳,还是取沉淀跑电泳?
谢谢各位网上的师兄师姐,如果做过这个实验的话,麻烦指点指点!
关于免疫共沉淀最后一步的问题?
答案:2 悬赏:0 手机版
解决时间 2021-04-15 21:09
- 提问者网友:兔牙战士
- 2021-04-15 15:44
最佳答案
- 五星知识达人网友:廢物販賣機
- 2021-04-15 16:51
最后一步煮沸以后,抗体和抗体结合的蛋白都变性了,从琼脂糖珠上脱落下来,所以有人直接就连珠子带上清就去电泳,琼脂糖进不了胶。或者为了样品跑出来好看,你直接转速再高点,甩一下,让大部分柱子都沉底,取上清电泳就行。
一般都用上样缓冲液煮沸了,珠子上不剩什么了。
一般都用上样缓冲液煮沸了,珠子上不剩什么了。
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- 1楼网友:慢性怪人
- 2021-04-15 18:00
我不会~~~但还是要微笑~~~:)
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