液相色谱所用流动相使用时应注意哪些问题

液相色谱所用流动相使用时应注意哪些问题

1、色谱柱中的流动相是否会会排干的问题：
不少做色谱分离试验的人遇到过这样的情形：不慎未及时补充流动相,泵将溶剂瓶中的流动相吸干了,HPLC系统由此而停止工作了.如此情况是否会损坏色谱柱?泵是否已将色谱柱中所有流动相都排干了?色谱柱还能使用吗?事实上,如果泵将溶剂瓶中的流动相吸干,并不会造成色谱柱的损坏.即使泵中充满了空气,泵也不会将空气排入色谱柱.因为泵只能输送液体,而不能输送空气.
2、色谱柱变干的问题：
另一个更可能发生的情况是忘记盖上色谱柱两端的密封盖或盖子太松而使色谱柱变干.同样,整个色谱柱干涸的情况不太容易发生,多半可能只是色谱柱两端的几个毫米变干了,因挥发掉所有溶剂是色谱柱变干需要相当长的时间.即使色谱柱真的变干了,也不一定就不可救药了.可以尝试用一种完全脱气的、表面张力低的溶剂（如经氦气脱气的甲醇）冲洗色谱柱以除去气体.较低的表面张力有助于浸润填料表面；已脱气的溶剂应该能够溶解并去除滞留在填料中的气体.色谱柱大约需要（以1mL/min的流速）冲一个小时或更多的时间被彻底浸润,恢复到正常状态.

有机相和非有机相，一般有乙腈+水，甲醇+水，有时候还可以有三相或四相，加酸和加盐改善分离