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(15分)基因敲除是应用DNA重组原理发展起来的一门新兴技术。“基因敲除细胞”构建过程如下:第一步:从小鼠囊胚中分离出胚胎干细胞(ES),在培养基中扩增。这些细胞中需要改造的基因称

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解决时间 2021-12-28 21:42
(15分)基因敲除是应用DNA重组原理发展起来的一门新兴技术。“基因敲除细胞”构建过程如下:
第一步:从小鼠囊胚中分离出胚胎干细胞(ES),在培养基中扩增。这些细胞中需要改造的基因称为“靶基因”。
第二步:构建基因表达载体。取与靶基因序列同源的目的基因(同源臂),在同源臂上接入neoR(新霉素抵抗基因)等。由于同源臂与靶基因的DNA正好配对,所以能像“准星”一样,将表达载体准确地带到靶基因的位置。
第三步:将表达载体导入胚胎干细胞,并与其内靶基因同源重组,完成胚胎干细胞的基因改造。
第四步:基因改造后的胚胎干细胞增殖、筛选。
请根据上述资料,回答下列问题:
(1)在把与靶基因序列同源的目的基因导入受体细胞前,应首先完成 。
(2)如果要获得一只含目的基因的小鼠,则选择的受体细胞通常是 ;若用大肠杆菌储存目的基因,则需先将其处理为 细胞。
(3)上述资料中neoR基因的作用最可能是 。
(4)获得的小鼠,通过有性生殖产生的后代是否都含该目的基因 。表达载体的构建
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