关于PCR溶液体系的配制
答案:1 悬赏:0 手机版
解决时间 2021-02-01 10:13
- 提问者网友：酱爆肉
- 2021-01-31 23:49
关于PCR溶液体系的配制
最佳答案
- 五星知识达人网友：纵马山川剑自提
- 2021-02-01 01:15
加入量和浓度有关，只要知道每一个要加入物质的浓度就可以算出来了：
模板的体积=25ng/模板的浓度 （这个值需要测定，如果实在不知道模板浓度，就加0.1-0.5ul左右吧）
引物的体积=0.5umol/1000uL * 10uL / 引物浓度 （根据自己配制的情况，有时候可能是100mM或者是200mM）
Taq酶体积= 0.5 U / Taq 酶活力单位浓度（标注在管子上，U/uL表示的数字）
Buffer的量应该是1uL。（这里需要解释一下，经过确认，没有1X的buffer，因为如果是1X的话，没法加了，所以正确的应该是10X的buffer，加入量就是稀释10倍，所以10uL体系加1uLbuffer）
模板的体积=25ng/模板的浓度 （这个值需要测定，如果实在不知道模板浓度，就加0.1-0.5ul左右吧）
引物的体积=0.5umol/1000uL * 10uL / 引物浓度 （根据自己配制的情况，有时候可能是100mM或者是200mM）
Taq酶体积= 0.5 U / Taq 酶活力单位浓度（标注在管子上，U/uL表示的数字）
Buffer的量应该是1uL。（这里需要解释一下，经过确认，没有1X的buffer，因为如果是1X的话，没法加了，所以正确的应该是10X的buffer，加入量就是稀释10倍，所以10uL体系加1uLbuffer）
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