我用HPLC测了下混合物,然后用制备色谱在等度条件下分离出一个峰,然后再在相同条件下用HPLC检测这个峰,结果

我用HPLC测了下混合物,然后用制备色谱在等度条件下分离出一个峰,然后再在相同条件下用HPLC检测这个峰,结果

你提供的信息不够全面，只能提供一些建议供你参考。
你所说的情况一般有如下原因：
1、化合物的稳定性有问题。如我们所知，一些化合物容易发生结构变化，在分离过程会出现降解。尤其是当你制备时使用的pH条件或制备过程未避光而你所处理的化合物在溶液状态下有光敏性时。
2、分析条件有问题一。一些化合物本来就有结构异构现象，而紫外的检识能力是很弱的，不能分辨结构异构，但液相是分离后检识，因此在液相上看到有两个峰但紫外只看到一种图。例如：水飞蓟宾是有异构的，市售的所谓99%水飞蓟宾在液相上看到的是两个峰，中检所的对照品也这样，但两个峰的紫外图是基本一样的。
3、分析条件有问题二（这个的可能性大些）。液相检测条件有问题，你看到的两个峰其实是一个东东，但是因为色谱条件没选择好，出现了假峰。这种情况往往是由于存在液相检测时存在溶剂化效应而产生的。色谱表现为：主峰背个小峰，改变色谱条件后也无法完全分开。

解决问题的建议：一、用其他色谱手段检测你分离到地目标化合物。如用TLC跑板看看。TLC的分离能力弱些，但定性鉴别方面有其独到之处。如果TLC上可看到两个明显分开的斑点，那么可以肯定你分到的东西是两个化合物，那么就检查一下你测定混合物的色谱条件，改进一下。
二、将分离到的化合物重结晶后再用液相检测。如果还是两个HPLC峰，且TLC也检也是两个斑点，那么你得考虑用其他分离手段。很可能你分的是有手性异构的化合物，需要专用的色谱柱来分。自己如果无法搞定，可求助于专业公司，如专搞手性分离的公司等。
哦，对了，如有可能应当你查一下你所分离的目标化合物的性质，如是已知化合物，应当有文献可供参考，不必自己用试差法探索。如为未知化合物，请结合上述建议先行确定问题所在，再试其他方法吧。追问我做的是分离杜仲中的物质，性质还算稳定。今天问我们老师，她们说估计是药品污染了，或者是柱子不一样，可是我两次做HPLC用的是同一根色谱柱，第一次用HPLC是想知道有几个峰，然后用只能等度洗脱的半制备色谱分离含量比较高的两个峰。不过我接的样不多，然后把接的样还是用第一次做HPLC的色谱条件去检测看半制备接的样的纯度，结果却出来两个峰，而且这两个峰的紫外图是一样的，跟第一次做HPLC时出现的那个峰的紫外图是一样的。

没有看明白你的意思。你在说详细一点吧。或者你去“色谱世界”去看看，那里非常专业。 追问我做的是分离杜仲中的物质，性质还算稳定。今天问我们老师，她们说估计是药品污染了，或者是柱子不一样，可是我两次做HPLC用的是同一根色谱柱，第一次用HPLC是想知道有几个峰，然后用只能等度洗脱的半制备色谱分离含量比较高的两个峰。不过我接的样不多，然后把接的样还是用第一次做HPLC的色谱条件去检测看半制备接的样的纯度，结果却出来两个峰，而且这两个峰的紫外图是一样的，跟第一次做HPLC时出现的那个峰的紫外图是一样的。

没有看明白你的意思。你在说详细一点吧。或者你去“色谱世界”去看看，那里非常专业。