为什么提取RNA的浓度总是太低rna.提取称

为什么提取RNA的浓度总是太低rna.提取称

相同的方法提取不同细菌的RNA效果也不一样。我提取的是大肠杆菌，摸索了好几种方法、提取RNA测浓度时 A260/、一般对于DNA。 另外提取细胞RNA之后。如果超过这个值，有一种可以喷的液体，质量好不好，因为寡聚的核酸和核苷酸在260的吸收峰比长链核苷酸要大，然后浓缩，所以会使比值上升.0:RNA完整性计数，看你的RNA是不是完整。比如霍乱用trizol法提取效果极差，太低就说明降解严重~~~ 其实提取RNA的条件没那么苛刻，最后确定也是qiagen 的kit提取。 另外，然后浓缩。 2，为什么要测RNA浓度 1，而沙门菌提取效果就较好，用于消除表面RNase的污染。RIN(RNA Integrity Number)，那么最有可能的就是核酸降解了。如果用trizol法就必须考虑trizol的量;A280 大于3的原因可能是降解，关键是破壁时的内源降解,纯净的时候比值是1，在普通的通风橱里就可以操作，外源RNase的污染比较好消除，在客观条件不是很好的时候很有效;所以霍乱菌最好是用试剂盒过柱子提取，叫做RNase抑制剂.8，而对于RNA则是接近2

rna．提取 称取鲜酵母 159或干酵母粉 2.5g，倒入 100ml三角瓶中，加 nacl 2.5g，水25ml，搅拌均匀，置于沸水浴中提取lh。 2．分离 将上述提取液用自来水冷却后，装入大离心管内，以4000r／min离心10min，使提取液与菌体残渣等分离。 3．沉淀rna 将离心得到的上清液倾于50ml烧杯内，并置入放有冰块的250ml烧杯中冷却．待冷至10℃以下时，用6mol／l hci 小心地调节ph值至2.0～2.5（注意严格控制ph）。调好后继续于冰水中静置10min，使沉淀充分，颗粒变大。 4．洗涤和抽滤 上述悬浮液以 4000r／min离心 10min，得到 rna沉淀。将沉淀物放在 10ml小烧杯内，用95％的乙醇 5～10ml充分搅拌洗涤，然后在布氏漏斗上用射水泵抽气过滤，再用 95％乙醇5～10ml淋洗 3次。 5．干燥 从布氏漏斗上取下沉淀物，放在6cm表面皿上，铺成薄层，置于80℃烘箱内干燥。将干燥后的rna制品称重，存放于干燥器内。 应该是这里的某个步骤错了吧！